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    返回列表 來源:未知 發布日期:2021-08-16 09:07【

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        利用DEAE-SFF柱將超濾處理后的粗酶液進行分離 純化。將超純水、1 mol/L NaCl溶液、0.1 mol/L磷酸鹽緩 沖溶液(pH 6.8)、體積分數20%的乙醇溶液過0.22 μm 膜備用。先利用過膜的超純水清洗系統和DEAE-SFF層析 柱,再使用0.1 mol/L磷酸鹽緩沖溶液(pH 6.8)清洗系統 和平衡柱子。超濾后樣品經過0.22 μm膜過濾后上樣,洗 脫流速為1.0 mL/min,收集速度5 mL/管,并按收集順序 從標記管號,測定所收集各峰組分的PPO活性和蛋白質 濃度。用0.1 mol/L磷酸鹽緩沖液將PPO活性測定體系的pH 值范圍調整到4.0~8.0之間,并按照0.4的pH值衡量單位 以確定PPO的最適反應pH值。以鄰苯二酚溶液為底物, 待鄰苯二酚溶液在指定pH值(pH 4~8)平衡后,迅速加 入PPO,測定其420 nm的吸光度,后續實驗均采用最佳 pH值。





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